FAQ

Der Inhaltsstoff von # R0011 ist geheim. # R0011 enthält KEIN Ethidiumbromid. Die extrahierte RNA aus Polyacrylamid-Gel mit RNA Färbelösung erhält die Integrität (d.h. es wird kein Abbau beobachtet) und die Klonierungseffizienz von cDNA aus der extrahierten RNA ist gut.

Der kleine RNA Marker (# R0007) enthält etwa 6,4 Mikrogramm RNA, die eine Mischung aus fünf einzelsträngigen RNAs, 20, 30, 40, 50 und 100 Basen ist. Grob gesagt ist die Konzentration von jedem Fragment etwa 0,05 mg/ml (die Konzentration von jedem Fragment ist geringfügig unterschiedlich). Wenn Sie ein oder zwei Mikro L kleine RNA Marker (# R0007) auf einen Träger Polyacrylamid-Gel in Elektrophorese laden, sind RNA-Banden durch Ethidiumbromid-Färbung zu sehen. In diesem Fall müssen Sie die Markierung nicht mit Radioisotopen kennzeichnen.

Die Gesamt-RNA in einem Kit des kleinen RNA Marker (R0007) beträgt etwa 6,4 Mikrogramm, wobei die Konzentration etwa 0,2 mg/ml beträgt. Der kleiner RNA Marker (R0007) besteht aus fünf einzelsträngigen RNAs, 20, 30, 40, 50 und 100 Basen. Die Konzentration jedes Fragments ist jeweils etwas anders, weil jede RNA-Menge so eingestellt wurde, dass eine gute Sicht bei der Elektrophorese möglich ist. Achten Sie darauf, dass diese RNA Marker nicht zur Verwendung in der quantitativen Analyse bestimmt sind.

Das System hat erfolgreich Proteine > 120 kDa expressiert (z.B. SARS S-Protein). Obwohl die Ausbeute nicht so hoch wie bei Proteinen mit Molekulargewicht <80Kd sein kann, sind wir in der Lage, dies durch mehr Lysate zu kompensieren, um die gesamte erforderliche Menge an Proteinen für den Kunden herzustellen.

Eine neuartiges hocheffizientes und robustes Weizenkeimzellfreies Proteinsynthesesystem wurde von Professor Yaeta Endo von der Ehime Universität, Japan entwickelt. Das RNA-N-Glycosidase Tritin und andere Inhibitoren wie Thionin, Ribonukleasen, Desoxyribonukleasen und Proteasen, die aus dem Endosperm stammen und die Übersetzung hemmen, wurden durch extensives Waschen von Weizenkeimembryos entfernt. Die in vitro-Expression unter Verwendung des Extraktes aus Weizenkeimen frei von Inhibitoren und optimiertem Expressionsvektor ist hoch effizient und stabil, und kann ein Protein voller Länge, bis 70-80 kDa, übersetzen. Publikationen zum Weizenkeim in vitro Expressionssystem sind nachfolgend aufgeführt:

1: Sawasaki T, Ogasawara T, Morishita R, Endo Y. A cell-free protein synthesis system for high-throughput proteomics.Proc Natl Acad Sci U S A. 2002 Nov 12;99(23):14652-7. Epub 2002 Oct 30.PMID: 12409616 [PubMed - indexed for MEDLINE]

2: Sawasaki T, Hasegawa Y, Tsuchimochi M, Kamura N, Ogasawara T, Kuroita T, Endo Y. A bilayer cell-free protein synthesis system for high-throughput screening of gene products.FEBS Lett. 2002 Mar 6;514(1):102-5.PMID: 11904190 [PubMed - indexed for MEDLINE]

3: Morita EH, Sawasaki T, Tanaka R, Endo Y, Kohno T. A wheat germ cell-free system is a novel way to screen protein folding and function.Protein Sci. 2003 Jun;12(6):1216-21.PMID: 12761392 [PubMed - in process]

4: Kigawa T, Yabuki T, Yoshida Y, Tsutsui M, Ito Y, Shibata T, Yokoyama S. Cell-free production and stable-isotope labeling of milligram quantities of proteins.FEBS Lett. 1999 Jan 8;442(1):15-9.PMID: 9923595 [PubMed - indexed for MEDLINE]

5: Madin K, Sawasaki T, Ogasawara T, Endo Y. A highly efficient and robust cell-free protein synthesis system prepared from wheat embryos: plants apparently contain a suicide system directed at ribosomes.Proc Natl Acad Sci U S A. 2000 Jan 18;97(2):559-64.PMID: 10639118 [PubMed - indexed for MEDLINE]

Wir verwenden einen sehr immunogenen Stamm von Mäusen, die nicht Balb/c für die Produktion monoklonaler Antikörper sind. Wir möchten nicht mit Hamstern und Ratten arbeiten.

Wir sieben Hybridomen mit ELISA und Western Blot gegen bereitgestelltes Protein. Wenn Sie andere Leistungen wünschen, müssen Sie Material an uns senden. Wir werden für Sie prüfen.

Wir werden unser Bestes versuchen, um das Unlösliche einschließlich der Verwendung von 1,5% Sarcosin aufzulösen. Wir können auch versuchen, das im bakteriellen Einschlusskörper beibehaltende unlösliche Protein zu injizieren, um Antikörper zu erzeugen.

Mindestens 20 Aminosäuren.

Wenn Mäuse mit konjugierten Peptid immunisiert wurden, garantieren wir nur Antikörper zu produzieren, die synthetisiertes Peptid erkennen. Wir garantieren nicht die Erkennung der Peptidsequenz im natürlichen Protein, da synthetisiertes Peptid nicht die korrekte Faltstruktur aufweisen kann.

Wir machen überwiegend IgG2a und IgG2b-Antikörper.

Ja, es ist ein optionaler Dienst. Abnova kann nicht garantieren, dass Antikörper das Lysat erkennen, da es (1) Unsicherheiten über die Qualität von Lysaten gibt, die von Kunden bereitgestellt werden, und (2) in Bakterien exprimierte Antigene eine vollkommen andere Konformation als in Säugetier Lysate expressierte Proteine haben.

Ja. Wenn cDNA oder Plasmid-DNA zur Verfügung standen, kann Abnova Vektoren zum Klonen kostenlos zur Verfügung stellen; alternativ ist Subklonierung durch Abnova für zusätzlich 200 US-Dollar verfügbar.

Ja, die Kunden erhalten alle Hybridomklone, die für die Kunden entwickelt werden sollten. Die Kunden erhalten bei einem normalen, benutzerdefinierten Produktionsdienst bis zu 5 Klone. Zusätzliche Klone werden entsprechend berechnet.

Wenn Sie uns cDNA zur Verfügung stellen, können wir sie in unseren Vektor subklonen, und sie mit Weizenkeimen im in vitro Proteinexpressionssystem expressieren.

Wenn das Antigen ein Peptid ist, werden normalerweise 2 mg vor der Konjugation (1 mg KLH und 1 mg BSA) ausreichen. Wenn das Antigen ein Protein ist, reichen 500 µg/Maus in einer Konzentration von 0,5-1 mg/ml in der Regel aus.

Abnovas Immunisierungsprotokolle können für native Proteine, rekombinante Proteine und Peptide angepasst werden. Für die menschliche Gesundheit schädliche Antigene werden nicht akzeptiert.

Abnova verwendet eine Nicht-Fusions-Antikörperbibliothek des gesamten Immunrepertoires anstatt Myelomfusion (<1% Schmelzrate) für Mab Erzeugung und Screening.

Kaninchen Mab hat eine breitere Antikörpervielfalt, Antigenität, Affinität, Spezifität und Anwendbarkeit als Maus Mab.

Das hängt von der Größe (z.B. Peptid vs. Protein) und Sequenzhomologie (beispielsweise Mensch vs. Kaninchen) des Antigens ab.

Kunde

Die Berechnung der Antikörperproduktion basiert auf Meilensteinen, daher wird das Risiko für den Kunden minimiert.

Ja.

Ja.

Ja, einschließlich verschiedener Arten Fc, Fc-Isotyp, Biotin, Streptavidin HRP.

Nein. Die Plasmide sind proprietäre Technologie von Abnova.

Ja. Es wird eine zusätzliche Gebühr für die Antikörpersequenz erhoben, kann aber je nach Umfang der nachfolgenden rekombinanten Antikörperproduktion verringert oder ausgeschlossen werden.

Ja.

Das Human S100B ELISA-Kit misst das Gesamt S100B im Serum, Heparinplasma und Liquorproben. Es ist spezifisch für die S100 beta-Untereinheit, S100 beta-beta und beta-alpha-Dimeren. Es gibt keine Kreuzreaktion mit S100 A1, S100 P und S100 P Z Proteinen.

Leider testen wir nicht die Kreuzreaktivität von Rattenproben in unserem Menschen Clara-Zellprotein ELISA. Es kann funktionieren, aber wir haben keinen Beweis dafür. Wir werden in Kürze Kreuzreaktivität-Daten in vielen Assays, darunter Clara-Zellprotein ELISA, erhalten.

Serum und Heparin-Plasma werden für dieses Assay bevorzugt. Wir können nicht empfehlen, EDTA oder Citrat-Plasmaproben zu verwenden.

Unser Markierungsverfahren erfolgt nicht über Aldehyd. Unser Markierungsverfahren ist wie unten beschrieben.

Außerdem ist die Konjugationseffizienz nahezu 100% und die Konjugat Sammelrate mehr als 90％.

Wir erhalten in der Regel 5ml Aszites von jeder Balb/c-Maus und 8-10ml von jeder SCID-Maus. Der allgemeine Aszitesdienst basiert auf der Anzahl von verwendeten Mäusen, um die Menge des vom Kunden benötigten Aszites zu erzielen. Wir können allerdings nicht denselben Ertrag für jede Zelllinie garantieren, da jede Zelllinie eine bestimmte Wachstumscharakteristik hat. Wenn allerdings eine absolute Quantität gewünscht wird, können wir dies durch die Injektion von mehr Mäusen erreichen.

Abnova benötigt von den Kunden Informationen zum Medium und der Wachstumsrate der Hybridomzelllinien. Wenn die Kunden die Isotypisierung QC-Daten für das Hybridom haben, würden wir diese Informationen auch benötigen. Auf der anderen Seite können Isotypisierung-Tests auf Wunsch für die Kunden durchführen.

Endogenes, untransfiziertes Lysat wird als Kontrollprobe zum Vergleich der Reaktivität erzeugter Antikörper gegen das Zielprotein auf Western Blot verwendet. Es ist schwierig, die genaue Menge des durch die untransfizierten Zellen im Vergleich zu transfizierten Zellen expressierten Proteins von vornherein zu wissen. Transfizierte Zellen neigen dazu, eine größere Menge des Proteins von Interesse zu expressieren, was empfänglicher für den Antikörpernachweis ist. Die Western-Blot-Bilder von Antikörpern gegen untransfizierte und transfizierte Zell-Lysate werden in Tandem gemacht, unter Berücksichtigung von Faktoren, wie z.B. primäre und sekundäre Antikörperkonzentration, die Entwicklung und das Belichtungszeitintervall, um die besten Resultate und Vergleichsergebnisse zu erzielen.

Einzelheiten der Zahlung werden auf der Rechnung ausgewiesen, die zusammen mit Ihrer Lieferung gesendet wird. Folgende Zahlungsmittel werden akzeptiert:
• Kreditkarte
• Schecks
• Banküberweisung
Wir nehmen keine Zahlungsanweisungen oder Bargeld an.

Wenn Sie irgendeinen Defekt bei Erhalt der Ware(n) finden, informieren Sie uns bitte innerhalb von 10 Tagen. Wir werden ein fehlerhaftes Produkt sofort ersetzen. Wenn Sie ein Produkt erhalten, das nicht in Ihrem Experiment funktioniert, brauchen Sie es nicht zurückzugeben. Allerdings brauchen wir Ihre experimentellen Daten für den nächsten Prozess. Füllen Sie bitte ein Formular zur Fehlersuche aus. Wir werden sicherstellen, dass Sie die volle Unterstützung unseres professionellen Teams erhalten.